بررسی تنوع ژنتیکی سویه های کاندیدا آلبیکنس جدا شده از واژنیت کاندیدیایی زنان مراجعه کننده به مراکز درمانی شهر تهران بااستفاده از تکنیک multi locus sequence typing

واژینیت کاندیدیایی یک مشکل ژنیکولوژی مهم در پزشکی می باشد تقریباً 75% از زنان در طول زندگی خود حدالاقل یک بار مبتلا به کاندیدیازیس واژینال می شوند. در 95-85% موارد، عامل اصلی کاندیدیازیس واژینال کاندیدا آلبیکنس می باشد.از ژن های مهم که در بیماری زایی کاندیدا نقش دارند می توان به agglutinin like sequence genesاشاره نمود که پروتئین های موثر در چسبندگی و اتصال کاندیدا آلبیکنس را کد میکنند. mlst یک تکنیک مفید با قدرت افتراق پذیری بالا جهت مطالعه و بررسی اپیدمیولوژی و بررسی ارتباط ژنتیکی در بین پاتوژن های قارچی از طریق تعیین توالی در کل ژنوم میباشد. در این تکنیک به طور معمول شش تا هشت ژن کروموزومی غیر وابسته تعیین توالی میشود و اطلاعاتی راجع به شباهتها و اختلافات بین ایزوله در اختیار ما قرار میدهد.در این مطالعه سویه های کاندیدا آلبیکنس از نمونه های واژنیت کاندیدیایی زنان مراجعه کننده به کلینیک زنان جدا سازی شد، پس از کشت روی محیط سابورو دکستروزآگار و شناسایی قطعی با pcr-rflp، به منظور ارزیابی مقاومت ایزوله ها به فلوکونازول، تست دیسک دیفوژن مطابق استاندارد clsi برای آنها انجام شد.سپس بیان نیمه کمی ژن های als1,3 کاندیدا و میزان تنوع ژنیتیکی سویه ها به ترتیب با تکنیک rt-pcr و mlstمورد ارزیابی قرار گرفت. در این مطالعه 53 ایزوله بالینی کاندیدا آلبیکنس از میان 150 سویه، باروش pcr-rflp شناسایی شد و 50 ایزوله مقاوم و 3 ایزوله حساس جدا سازی شد.نتایج حاصل از بررسی بیان ژن نشان داد که 39 ایزوله (5/73%) هر دوژن als1 وals3 را بیان نمودندو 3 ایزوله یکی از ژن های als را بیان نموده در حالیکه 11 ایزوله (5/20%)هیچ کدام از ژن ها را بیان نکردند و ارتباطی مستقیم بین بیان این ژن ها در ایزوله ها و مقاومت به فلوکونازول وجود داشت.. نتایج حاصل از تعیین توالی dna در سویه های مورد مطالعه نشان داد که شماره آللیک جدیدی در بین ایزوله ها پیدا نشد ولی 15 استرین تایپ جدید شناسایی شد. همچنین بیشترین تعداد تغییرات نوکلئوتیدی(جایگاه پلی مورفیسم) و بیشترین تعداد اسید های آمینه پلی مورفیک مربوط به لوکوس های vps13 و adp1 بوده است. ایزوله هایی حساس به فلوکونازول که فاقد بیان ژن های als1,3 بودند و همچنین ایزوله هایی بیمارانی که دارای بیماری زمینه ای بوده یا هورمون تراپی داشتند ارتباط ژنتیکی نزدیکی با هم داشتند. با توجه به نتایج به دست آمده، ایزوله های مورد بررسی در جمعیت زنان مبتلا به واژینال کاندیدیازیس دارای تنوع ژنتیکی بوده و ارتباط ژنتیکی نزدیکی به هم داشتند که نشان دهنده این است که کلونال کلاسترهای های جدیدی توسط کاندیدا آلبیکنس های عامل واژینیت در ایران در حال شکل گیری است که میتواند در بین بیماران قابل انتقال باشدودر ایجاد واژینیت مزمن و عودکننده مقاوم به فلوکونازول نقش مهمی داشته باشدشیوع بالای عفونت های واژینال کاندیدیایی و در پی آن عودهای مکرر آن و مقاومت های بالای دارویی ضرورت استفاده از روشهای شناسایی ژن های ویرولانس دخیل در آن و تعیین الگویی ژنوتایپی و همچنین تنوع ژنتیکی سویه های کاندیدا آلبیکنس را بیشتر آشکار میسازد.